2005年，出演首部作品《黄飞鸿与十三姨》，挑战泼辣强势的大小姐角色。

2009年，拍摄了导演王小康执导的家庭伦理情感戏《婚后三十年》，扮演该剧的女主角“康小丽”；随后，拍摄女性情感励志剧《天涯织女》，在剧中饰演强势泼辣的方家染坊大小姐“方静”。

2010年4月，加盟惊悚喜剧电影《囧探佳人》的拍摄，何彦霓的角色是一个被老公冷落的官府太太；5月，参与梁羽生武侠代表作之一的《新萍踪侠影》的拍摄，出演侠女澹台镜明；11月，与张庭、李小璐共同主演了宫廷魔幻悬疑剧《美人天下》；同年，拍摄刘猛执导的抗日题材作品《特战先锋》，扮演日本特工樱花三人组的队长北泽晶。

2011年1月，拍摄魔幻色彩的爱情电影《芳香之城传奇》；3月，主演讲述天津杨柳青年画的年代剧《杨柳青》，扮演女画家王雨荷一角；8月，拍摄了徐小明执导的，由胡军、唐国强、佘诗曼共同主演的历史剧《建元风云》，何彦霓在剧中饰演的是蒙族女孩云林；12月，与迟帅搭档，在黄祖权执导的历史剧《薛丁山》中饰女山贼。2012年5月，拍摄以旧上海的历史风云为背景的《像火花像蝴蝶》，挑战演绎一位心狠手辣的风尘女房东。

2014年3月，与陈键锋共同主演古装喜剧《封神英雄榜2》，在剧中饰演姜子牙妻子马招娣；9月，与韩栋、魏子合演以民国最大藏书阁宣家的兴衰史为背景的年代励志剧《碧血书香梦》，剧中何彦霓饰演了一位出生卑贱的草根女。

2016年1月，与谢苗、张赫、焦恩娜主演网络大电影《大梦西游》，饰演唐小剑老板，美丽动人，善良、自身为花妖；3月。与郑元畅、王丽坤共同主演古装玄幻电视剧《天泪传奇之凤凰无双》剧中何彦霓饰演睿王妃杜若。

2020年11月23日，主演的电视剧《澳门往事》在爱奇艺播出，她在剧中扮演伊妍。12月2日，主演的大型动作罪案剧《功夫战警》播出。

2021年4月13日，主演的农村剧《日头日头照着我》在安徽卫视播出；参演电视剧《铸匠》。